本發(fā)明一種用超敏化學(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫吸附定量 測(cè)定人Her－2/Neu癌基因可溶性產(chǎn)物sp185Her －2的方法。使用奧地利Bender MedSystems GmbH公司的一對(duì)抗sp185Her－ 2單克隆抗體，采納固相雙位點(diǎn)夾心式酶聯(lián)免疫 吸附技術(shù)，用抗sp185Her－2單克 隆抗體包埋小容量微孔后，樣本中sp185Her－ 2結(jié)合在包埋抗體上；加入辣根過氧化酶(HRP) 聯(lián)結(jié)的單克隆抗sp185Her－2抗 體后，它和已被第一抗體捕獲的sp185Her－ 2結(jié)合；孵育后洗除未結(jié)合的抗 sp185Her－2酶聯(lián)結(jié)抗體；加入辣 根過氧化酶超敏化學(xué)發(fā)光底物后；通過化學(xué)發(fā)光儀測(cè)定425nm 處發(fā)光量來(lái)定量樣本中sp185Her－ 2濃度。本法檢測(cè)線性范圍0－10ng/ml sp185Her－2 (R2＝0.9999)，最低檢測(cè)限度 40.15pg/ml sp185Her－2。本發(fā)明 改進(jìn)Bender MedSystems ELISA，采用小容量微孔板，在不影 響反應(yīng)敏感性的前提下，減少了包埋抗體和其他反應(yīng)試劑的使 用量，加快了反應(yīng)速度；采用超敏化學(xué)發(fā)光底物和化學(xué)發(fā)光儀， 加寬了檢測(cè)線性范圍，使檢測(cè)限度下移，提高了反應(yīng)敏感性。 人血清Her－2/Neu癌基因可溶性產(chǎn)物sp185Her －的測(cè)定，實(shí)時(shí)觀察乳腺癌患者術(shù)后 sp185Her－含量的變化，有助于 預(yù)后的臨床評(píng)估。本發(fā)明為進(jìn)一步研發(fā)臨床適用的診斷試劑盒 奠定了基礎(chǔ)。