本發(fā)明涉及三維DNA納米結(jié)構(gòu)、電化學(xué)生物傳感器及其制備方法和應(yīng)用。所述三維DNA納米結(jié)構(gòu)為六面體結(jié)構(gòu)，且所述六面體結(jié)構(gòu)可通過(guò)與不同目標(biāo)分子相結(jié)合而發(fā)生結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變并導(dǎo)致電化學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)變。所述三維DNA納米結(jié)構(gòu)單元底面四個(gè)頂點(diǎn)通過(guò)自組裝作用固載在金電極表面。本發(fā)明將該DNA納米結(jié)構(gòu)組裝在電極表面構(gòu)置了新型電化學(xué)生物傳感器，六面體結(jié)構(gòu)的DNA具有高特異性識(shí)別目標(biāo)分子和高穩(wěn)定性的特性，提高了電化學(xué)生物傳感器的分析性能；本發(fā)明所構(gòu)置的電化學(xué)生物傳感器可通過(guò)替換DNA鏈實(shí)現(xiàn)凝血酶、溶菌酶等不同待測(cè)物的檢測(cè)，應(yīng)用范圍廣泛。