本發(fā)明涉及生物化學(xué)中核酸檢測的技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種基于CRISPR方式檢測非洲豬瘟病毒的crRNA及試劑盒。所述crRNA根據(jù)如SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:6所示的靶向位點設(shè)計得到。一種基于CRISPR方式檢測非洲豬瘟病毒的試劑盒，其包括所述的crRNA、單鏈DNA報告序列、緩沖液、試紙條、分析緩沖液及Cas蛋白。利用Cas蛋白在crRNA指導(dǎo)下切割非洲豬瘟病毒雙鏈DNA底物后釋放PAM遠(yuǎn)端產(chǎn)物，激活非特異性切割單鏈DNA活性的特點而設(shè)計的一種高靈敏度，高特異性的快速檢測非洲豬瘟病毒的試劑盒。