本發(fā)明公開了一種利用離體動物角膜模型多參數檢測眼刺激性的方法，含以下步驟：1)離體動物角膜的制備和維持；2)受試物暴露；受試物濃度、暴露時間和后孵育時間的確定；3)受試物評價參數的選擇；4)評價參數的測量；5)受試物眼刺激的評價與預測。本發(fā)明通過離體動物角膜短期體外維持培養(yǎng)，其類似于人體角膜且具有正常生理活性，通過受試物接觸角膜后，對多個評價參數進行測量和分析，從而評價受試物重復/多重暴露后對角膜的影響，預測其潛在眼刺激性。本發(fā)明方法可以代替?zhèn)鹘y(tǒng)Draize兔眼試驗，直接用于日化產品、化學品、藥品等產品/原料/配方潛在眼刺激性進行比較、評價和預測，具有通量高、成本低和時間短等優(yōu)點。