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RNA介導(dǎo)的DNA連接及在片延伸標(biāo)記檢測(cè)RNA病毒方法

1162   編輯:管理員   來源:中冶有色技術(shù)網(wǎng)  
2023-03-19 07:11:29
本發(fā)明涉及生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中病毒檢測(cè)微陣列芯片的方法,具體為一種RNA介導(dǎo)的DNA連接及在片延伸標(biāo)記檢測(cè)RNA病毒方法。其特點(diǎn)是:以待檢測(cè)病毒核酸序列為模板設(shè)計(jì)特異性檢測(cè)探針,檢測(cè)探針按兩部分進(jìn)行化學(xué)合成。如果“靶”病毒存在,則其檢測(cè)探針的兩部分可通過T4DNA連接酶連接。連接后的檢測(cè)探針與固定在芯片上的其相應(yīng)的捕獲探針雜交,以連接后的檢測(cè)探針為模板,以捕獲探針為引物,進(jìn)行在片DNA多聚酶聚合(包括Cy3-dUTP)反應(yīng)產(chǎn)生熒光信號(hào)。如果“靶”病毒不存在,則無熒光信號(hào)產(chǎn)生。該方法檢測(cè)的靈敏性比ELISA高十倍,檢測(cè)的最小稀釋濃度為萬分之一(10□4,感染提取液/無感染提取液)。以病毒基因組為信息載體設(shè)計(jì)特異性檢測(cè)探針、以基于靶RNA(所檢病毒RNA)為模板的檢測(cè)探針的連接、芯片雜交和在片DNA聚合酶延伸標(biāo)記反應(yīng)等實(shí)驗(yàn),建立一種操作方便的病毒檢測(cè)芯片方法。
聲明:
“RNA介導(dǎo)的DNA連接及在片延伸標(biāo)記檢測(cè)RNA病毒方法” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學(xué)習(xí)研究,如用于商業(yè)用途,請(qǐng)聯(lián)系該技術(shù)所有人。
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