本發(fā)明涉及一種檢測(cè)豇豆胰蛋白酶抑制劑的免疫膠乳微球及其制備方法,該免疫微球由抗CpTI蛋白多克隆抗體包被,微球顆粒大小200nm;所述免疫膠乳微球的制備方法包括以下步驟:設(shè)計(jì)全長(zhǎng)CpTI基因序列;將CpTI基因片段通過(guò)限制酶切割插入谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶(GST)基因融合表達(dá)載體中,構(gòu)建細(xì)菌融合表達(dá)載體;利用親合層析柱純化獲得GST-CpTI融合蛋白;將GST-CpTI融合蛋白抗原溶合弗氏佐劑后免疫小鼠,經(jīng)分離純化得到鼠抗CpTI多克隆抗體;將抗體通過(guò)化學(xué)偶聯(lián)法偶聯(lián)活化后的微球,得到檢測(cè)CpTI蛋白的免疫膠乳微球。本發(fā)明的有益效果為:靈敏度較高,且操作簡(jiǎn)單、重復(fù)性強(qiáng);所制備的免疫膠乳微球顆粒小,粒徑均勻,能檢測(cè)CpTI融合蛋白最低限0.2μg/ml,其相關(guān)系數(shù)R2=0.67。
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