本發(fā)明涉及使用散布在靶標(biāo)多核苷酸中的銜接頭來(lái)獲得靶標(biāo)序列的核苷酸序列信息的方法和組合物。該序列信息可以是新的,例如對(duì)未知核酸測(cè)序、再測(cè)序或者基因型分裂。本發(fā)明優(yōu)選地包括在靶標(biāo)多核苷酸或者多核苷酸片段內(nèi)的間隔位置上插入多個(gè)銜接頭的方法。這樣的銜接頭可以充當(dāng)平臺(tái),用于通過(guò)不同的測(cè)序化學(xué)法,例如那些通過(guò)引物延伸、探針連接等來(lái)鑒別核苷酸的測(cè)序化學(xué)法來(lái)起到詢(xún)問(wèn)鄰近的序列的測(cè)序化學(xué)法。本發(fā)明涵蓋這樣的方法和組合物,用于將已知的銜接頭序列插入靶標(biāo)序列,使得連續(xù)的靶標(biāo)序列被銜接頭所中斷。通過(guò)對(duì)銜接頭的“上游”和“下游”兩者測(cè)序,可以完成整個(gè)靶標(biāo)序列的鑒定。