本發(fā)明公開了對樣品中的核酸進行測序的方法,該方法基于使用末端-磷酸根-標記的核苷酸作為對于核酸聚合酶的底物。本發(fā)明的方法使用核苷多磷酸酯、二脫氧核苷多磷酸酯或脫氧核苷多磷酸酯類似物,它們具有連接到末端-磷酸根上的生色染料、化學發(fā)光或熒光部分、質(zhì)量標記或
電化學標記。當核酸聚合酶使用這種類似物作為底物時,酶-活化的標記將存在于磷?;D(zhuǎn)移的無機多磷酸酯副產(chǎn)品上,通過磷酸酯酶切割磷?;D(zhuǎn)移的多磷酸酯產(chǎn)品導致在其上連接的標記中的可測定的變化,在某些情況下標記的多磷酸酯可以通過標記而直接被測定,并且提供了關(guān)于核酸的信息。當聚合酶試驗在磷酸酯酶存在下進行時,提供了方便的實時監(jiān)測DNA或RNA合成和表征靶核酸的方法。
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