本文公開了生產(chǎn)適用于化學修飾和高通量DNA測序的DNA模板的新穎方法和組合物。本文也公開了DNA接頭設(shè)計的方法,其中組分胞嘧啶被5-甲基胞嘧啶取代使得所得接頭對亞硫酸氫鹽介導(dǎo)的脫氨作用具有抗性。當所述接頭連接至雙鏈DNA模板時,后續(xù)的DNA變性和亞硫酸氫鹽處理將模板DNA胞嘧啶差異脫氨形成尿嘧啶而所連接接頭的5-甲基胞嘧啶對這一化學轉(zhuǎn)化具有抗性使得接頭序列仍然保持不變。因此可用與未改變接頭序列雜交的單一引物組擴增亞硫酸氫鹽處理的DNA兩條鏈。也公開了生產(chǎn)具確定甲基化組成的對照模板以優(yōu)化亞硫酸氫鹽反應(yīng)的條件的方法。在優(yōu)選的實施方案中,本發(fā)明可用于生產(chǎn)適于使用傳統(tǒng)的SolexaTM、SOLiDTM或454TM-型DNA測序平臺進行全基因組亞硫酸氫鹽-DNA測序以研究DNA甲基化的模板。
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“用于高通量亞硫酸氫鹽DNA-測序的方法和組合物及其用途” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學習研究,如用于商業(yè)用途,請聯(lián)系該技術(shù)所有人。
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