本發(fā)明涉及生物組織的微觀觀察技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)一種觀察微小組織內(nèi)細(xì)胞立體分布及統(tǒng)計細(xì)胞數(shù)目的方法，將獲取的待觀察組織材料進行表面清洗后依次進行化學(xué)固定、脫水處理、免疫熒光染色和透明化處理；再將組織材料連同透明液移至共聚焦顯微鏡專用培養(yǎng)皿，用激光共聚焦顯微鏡進行逐層掃描拍照，獲得整體組織各層的細(xì)胞分布圖像，進行細(xì)胞立體分布的觀察，再通過Imaris軟件處理各層細(xì)胞分布圖像數(shù)據(jù)，重建細(xì)胞組織的三維模型，觀察三維立體模型中被免疫熒光標(biāo)記細(xì)胞的立體分布，再利用Imaris?Bitplane?Spot檢測分析，計算出免疫熒光標(biāo)記細(xì)胞的準(zhǔn)確數(shù)目。本發(fā)明的方法保持了待觀察組織的完整性，而且觀察細(xì)胞分布的清晰度和準(zhǔn)確度都高，細(xì)胞的數(shù)目統(tǒng)計結(jié)果更準(zhǔn)確。