本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種細(xì)胞保存液及其制備方法與應(yīng)用。所述細(xì)胞保存液包括醇、酸、緩沖鹽、離子強(qiáng)度維持劑、抗氧化劑和蛋白水解酶；所述細(xì)胞保存液通過添加蛋白水解酶，可以較好地處理多粘液和血細(xì)胞的樣本，提高薄層液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的染色效果；但是蛋白水解酶會(huì)影響還原蘭組織細(xì)胞染色效果，通過添加抗氧化劑，降低了蛋白水解酶對(duì)還原蘭組織細(xì)胞染色的影響，同時(shí)，提高了免疫細(xì)胞化學(xué)染色和還原蘭組織細(xì)胞染色的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性，并且，所述細(xì)胞保存液保存細(xì)胞樣本后對(duì)HPV檢測(cè)的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性無影響。即所述細(xì)胞保存液能同時(shí)滿足薄層液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)、HPV檢測(cè)、免疫細(xì)胞化學(xué)染色和還原蘭組織細(xì)胞染色四種篩查方法。