一種多用途聚賴(lài)氨酸熒光自組裝載藥納米微球及其制備方法與應(yīng)用。本發(fā)明采用納米自組裝技術(shù)制備了羅丹明標(biāo)記的聚賴(lài)氨酸熒光納米微球，并修飾了帶有二硫鍵的疊氮基團(tuán)側(cè)鏈，進(jìn)一步采用點(diǎn)擊化學(xué)方法將炔基修飾的藥物連接在熒光納米微球上。本發(fā)明所制備的鏈接藥物的聚賴(lài)氨酸納米自組裝微球可用于被修飾藥物在動(dòng)物以及細(xì)胞水平的示蹤成像分析。同時(shí)利用該微球還可以用于捕獲被修飾藥物的結(jié)合蛋白，并通過(guò)裂解二硫鍵可釋放出靶點(diǎn)結(jié)合蛋白及其關(guān)聯(lián)蛋白，可用于藥物作用靶點(diǎn)的研究。本發(fā)明提供了一種研究藥物作用靶點(diǎn)的簡(jiǎn)便快捷的工具和方法，該方法集合藥物示蹤、靶點(diǎn)定位、靶點(diǎn)蛋白捕獲及分離功能于一體，簡(jiǎn)便易行，在藥物作用機(jī)制研究以及靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)方面有很好的應(yīng)用前景。