本發(fā)明公開了一種人羊膜間充質(zhì)干細胞的分離純化及鑒定方法,hAMSCs的分離方法為將人羊膜剪成碎片,用EDTA的胰蛋白酶,DNaseI的膠原酶分二步旋轉(zhuǎn)消化,用鋼網(wǎng)過濾,收集細胞濾液即為分離的原始hAMSCs;hAMSCs的純化方法是原始hAMSCs用LG-DMEM培養(yǎng)基置于CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng),在倒置顯微鏡下除去完全未貼壁生長的羊膜上皮細胞,第3天更換新的培養(yǎng)基,待細胞匯合度達80~90%后,用胰蛋白酶—EDTA溶液消化收集細胞即可獲得高純度的hAMSCs;hAMSCs的鑒定方法采用免疫細胞化學(xué)染色波形蛋白和CK19以鑒別hAMSCs和羊膜上皮細胞,采用流式細胞術(shù)檢測CD29、CD44、CD166、CD34和CD45的表達。本發(fā)明方法具有hAMSCs高收率、高活性、高純度優(yōu)點,鑒定方法簡便、精準(zhǔn)。
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“人羊膜間充質(zhì)干細胞的分離純化及鑒定方法” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學(xué)習(xí)研究,如用于商業(yè)用途,請聯(lián)系該技術(shù)所有人。
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