本發(fā)明涉及藥物化學(xué)領(lǐng)域,具體公開了一種利用HTRF技術(shù)篩選UBC12/Dcn1小分子抑制劑的方法。該方法先成功構(gòu)建并原核表達(dá)純化得到純度較高的GST?Dcn1重組蛋白,合成UBC12 N末端乙?;揎椀??12個(gè)氨基酸序列作為底物。用分子間相互作用確定UBC12和Dcn1有活性并且能相互作用;然后再利用HTRF技術(shù)建立優(yōu)化的UBC12/Dcn1活性測(cè)定平臺(tái)。該反應(yīng)體系穩(wěn)定,可耐受較寬的pH范圍(5.5?8.0)及二價(jià)金屬離子、螯合物等;背景低,受到樣品的干擾非常少,假陽(yáng)性假陰性均低,可去除天然產(chǎn)物自發(fā)熒光的干擾,靈敏度高;易于實(shí)現(xiàn)微型化,通量高。
聲明:
“利用HTRF技術(shù)篩選UBC12/Dcn1小分子抑制劑的方法” 該技術(shù)專利(論文)所有權(quán)利歸屬于技術(shù)(論文)所有人。僅供學(xué)習(xí)研究,如用于商業(yè)用途,請(qǐng)聯(lián)系該技術(shù)所有人。
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