一種基于適體引發(fā)的核酸外切酶III(Exo?III)循環(huán)酶切的卡那霉素殘留的檢測(cè)方法及其應(yīng)用，屬于分析化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明主要是利用巰基自組裝的方式，將與卡那霉素適配體(K-aptamer)互補(bǔ)的單鏈DNA(ssDNA)修飾于金電極表面，加入少量K-aptamer與其配對(duì)形成少量雙鏈DNA(dsDNA)。隨后加入Exo?III，利用可特異性的酶切dsDNA中的ssDNA使得剩余的適配體釋放，重新與ssDNA結(jié)合形成dsDNA，引發(fā)再次酶切，若干循環(huán)后使得修飾ssDNA酶切完全。體系存在卡那霉素，通過與適配體的結(jié)合抑制循環(huán)酶切使ssDNA得以保留，且保留量與卡那霉素的濃度相關(guān)。利用電分析方法對(duì)ssDNA可靜電吸附電信號(hào)分子六氨合釕(RuHex)進(jìn)行定量實(shí)現(xiàn)卡那霉素殘留的檢測(cè)。該方法具有較高靈敏度，可實(shí)現(xiàn)牛奶中卡那霉素殘留的靈敏測(cè)定。