本發(fā)明公開了一種測定三磷酸腺苷的電化學發(fā)光傳感器系統(tǒng)及其制備方法和應用，所述系統(tǒng)由放大三磷酸腺苷濃度信號的磁性探針和測定Trigger DNA的電化學發(fā)光傳感器組成；磁性探針由Fe₃O₄納米粒子、金納米粒子、DNA substrate及aptazyme依次復合而成；電化學發(fā)光傳感器通過戊二醛交聯(lián)作用將氨基修飾的Capture DNA連接至修飾RuSiO₂?CS的工作電極表面得到。本發(fā)明中三磷酸腺苷先參與由磁性探針引導的恒溫擴增反應，并產生大量中間物Trigger DNA；隨后通過本發(fā)明的電化學發(fā)光傳感器對該中間物Trigger DNA進行定量檢測，最終達到間接定量檢測三磷酸腺苷的目的。